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    ELISA操作要點:ELISA實驗18條通用規則

    發布時間: 2023-06-03  點擊次數: 732次

    ELISA操作要點:ELISA實驗18條通用規則

    ELISA實驗操作所要求的條件是比較嚴格的,無論是對實驗的硬件條件還是對實驗的操作人員的技術要求,都是如此。下面所提到的就是一些在進行ELISA實驗時所要注意的一些問題。
    ELISA實驗18條通用規則
    1、要保證移液槍的準確性,誤差不能超過2%??捎盟碗娮犹炱竭M行確定。但最好有專業人員進行矯正。
    2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標準品時。
    3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結果更穩定。
    4、實驗時,要使底物避光保存。
    5、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。
    6、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
    7、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
    8、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
    9、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發。
    10、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加徹di。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
    11、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
    12、底物是光敏感的,要在臨用前現配。
    13、檢測前,要打開酶標儀,使之穩定10分鐘以上。
    14、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。
    15、待檢樣品要澄清,否則會影響結果。
    16、溫浴時間應遵守試劑盒規定。
    17、應盡量做雙孔實驗,這樣才能保證數據的準確性。
    18、對結果有疑問的樣品要用其它方法進行確證。

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