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    小鼠elisa kit的處理方法以及注意事項說明

    發布時間: 2021-10-26  點擊次數: 728次
       小鼠elisa kit的處理方法有哪些呢?今天我們來詳細講解一下!
      純化的小鼠C-反應蛋白(CRP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中加入C-反應蛋白(CRP),再與HRP標記的C-反應蛋白(CRP)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的C-反應蛋白(CRP)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠C-反應蛋白(CRP)的含量。
      elisa屬于固相免疫分析,抗原和抗體的結合只發生在固相表面。以抗體包被的三明治法為例,添加到板孔中的抗原不具有固相抗結合的平等機會。只有靠近孔壁的一層溶液中的抗原與抗體直接接觸。這是一個逐漸平衡的過程,因此需要擴散才能達到反應的終點。隨后添加到固相抗原的酶標記抗體的結合也是如此。
      不管你對實驗在懂,了解相關注意事項那是很有必要的,這不僅可以培養我們養成好的實驗習慣,還可以減少問題的。下面給大家講述一下小鼠elisa kit使用注意事項。
      1、嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育。所有試劑都須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
      2、洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
      3、消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
      4、底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經變藍的底物液不能使用。
      5、避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。
      6、在儲存和溫育時避免強光直接照射。
      7、平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
      8、包括小鼠elisa kit在內的任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發的氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
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